LNP Calculator
根据脂质配方快速计算实验体系。第一步：选择脂质配方并配置 Lipid Mix；第二步：输入制备参数（脂相浓度、FRR、N/P 比、RNA 用量），自动计算水相和脂相各组分体积。
第一步：选择 LNP 配方，配置脂质混合物
选择各脂质组分（支持 2–5+ 种），设置摩尔比和母液浓度，输入目标 Lipid Mix 体积后自动计算吸取量。
Cationic / Ionizable
--
Helper (Structural)
--
Sterol
--
PEG-Lipid
--
摩尔比总和（4 种组分）：100.0%
Lipid Mix 总浓度：29.71 mM(18.44 mg/mL)
我的配方
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第二步：定义 LNP 制备参数
设置脂相浓度、流速比 (FRR)、N/P 比和 RNA 用量，自动计算水相和脂相各组分体积。
制备参数
:
RNA 用量与体系体积
水相 Aqueous
RNA volume--
Citrate buffer--
Total--
脂相 Organic
Lipid mix--
Ethanol--
Total--
我的实验参数
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我的配方
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我的实验参数
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标准曲线
选择酶标仪预设或自定义曲线，点击已选中的按钮可展开 / 折叠标准点与曲线图。取消勾选某个标准点会将其从拟合中剔除，R² 与有效范围实时更新。
样本计算
每列为一个样本。读数会先经标准曲线换算为孔内浓度，再乘稀释倍数还原为样品浓度（ng/µL）。
8 个样本 · 两行读数支持从 Excel 直接粘贴（整行 / 整列 / 两行一起）
样本 1 | 样本 2 | 样本 3 | 样本 4 | 样本 5 | 样本 6 | 样本 7 | 样本 8 | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本名 | ||||||||
| 稀释倍数* | ||||||||
| 读数 · TE (1% Triton) | ||||||||
| 读数 · TE buffer | ||||||||
| LNP 体积 (µL) | ||||||||
| 投入 RNA 量 (µg) | ||||||||
| 需取用 LNP-RNA (µg) | ||||||||
| 计算结果 | ||||||||
| 总浓度 (ng/µL) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
| 游离浓度 (ng/µL) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
| LNP-RNA 浓度 (ng/µL) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
| 包封率 (%) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
| 得率 (%) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
| 取样体积 (µL) | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- | -- |
新手入门: LNP 制备流程
LNP 的制备通常采用手动制备（涡旋或吹打）或微流控混合法， 将溶解在乙醇中的脂质混合物与含 RNA 的水相快速混合， 自组装形成包裹核酸的纳米颗粒。
1
配制 Lipid Mix（脂相）
- 按摩尔比混合各脂质 stock solution
- 典型配方：阳离子脂质 + 辅助脂质 + 胆固醇 + PEG 脂质
- 溶剂：无水乙醇
2
配制水相 (Aqueous)
- RNA 溶于 pH 4.0 柠檬酸缓冲液
- N/P 比决定 RNA 与阳离子脂质的摩尔比
- FRR（流速比）决定水相 : 脂相体积比
3
快速混合
- 微流控混合、手工移液混合或涡旋混合
- 乙醇稀释使脂质自组装为纳米颗粒
- RNA 被包裹进 LNP 核心
4
后处理与表征
- 透析或超滤除去乙醇，换为 PBS
- 测量粒径 (DLS)、Zeta 电位
- 测定包封率 (EE%) 、总RNA浓度和 RNA 完整性等
N/P 比
阳离子脂质的可电离胺基 (N) 与核酸磷酸基 (P) 的摩尔比。典型范围 4–10，常用 6。建议配置高浓度的lipid mix混合液, 可短期 -20°C 储存。
FRR (Flow Rate Ratio)
水相与脂相的体积/流速比。经典 LNP 配方一般为 3:1（水相:脂相）。小试微流控的流速一般为10-20 ml/min, 需要根据芯片类型进行优化。
脂相浓度
脂质在有机相中的总摩尔浓度 (mM)，由 Lipid Mix 浓度稀释至目标浓度。 一般 4–20 mM。浓度会影响包封效率和粒径，一般高浓度具备高效率、大粒径，低浓度具有低效率、小粒径，浓度对手包的影响大于微流控。粒径显著影响 LNP 体内靶向性，需要慎重考量。